Специфични кораци за екстракцију хлорофила кроз ћелијску фрагментацију помоћу ултразвучне дробилице ћелија
Feb 20, 2024
Ултразвучна дробилица ћелија користи ефекат дисперзије ултразвука у течности да створи кавитацију, чиме се разбијају чврсте честице или ћелијска ткива у течности.
Развој биолошке индустрије подигао је захтеве за експерименте са ултразвучним ћелијским пулверизаторима, као што су мерење и контрола температуре узорка, побољшање нивоа интелигенције нискотемпературних узорака за хлађење и целе машине итд.
Специфични кораци за екстракцију хлорофила кроз ултразвучно дробљење ћелија помоћу ултразвучне дробилице ћелија:
1. Центрифугирајте или филтрирајте узорак воде и инсталирајте мембрану филтера од ацетатних влакана на усисни филтер. Сипајте квантитативну запремину узорка воде за филтрацију, а негативни притисак током филтрације не би требало да буде превисок (око 50кПа). Након што је узорак воде извучен, наставите да вучете 1-2 минута да бисте смањили влагу на мембрани филтера. Ако је потребно краткотрајно складиштење 1-2 дана, може се чувати у обичном фрижидеру за замрзавање. Ако је потребно дуготрајно складиштење (30 дана), треба га чувати у фрижидеру на ниској температури (-20 степен ).
2. Извадите филтерску мембрану која садржи фитопланктон и осушите је на ниској температури у фрижидеру 6-8 сати. Исеците га на мале комаде маказама и ставите у епрувету за центрифугу од 5 мл или 10 мл. Додајте 3-4 мл 90% ацетона да бисте потопили фрагменте испод нивоа течности. Ставите фрагменте у ултразвучни контејнер и користите ултразвучне таласе да разбијете ћелије узорка. (Упоређивање експеримената у различитим временима и фреквенцијама да би се олакшала идентификација * времена и фреквенције фрагментације за обједињене методе).
3. Центрифугирајте узорак који је подвргнут фрагментацији ћелија помоћу ултразвука помоћу центрифуге (3000-4000р/мин) 10 минута. Сипати супернатант у волуметријску тиквицу од 5 мл или 10 мл. Разблажите до 5мл или 10мл са 90% ацетоном и добро протресите.
4. Поставите супернатант на спектрофотометар и користите колориметријску посуду са оптичким путем од 1 цм да бисте очитали вредности апсорбанције на таласним дужинама од 750 нм, 663 нм, 645 нм и 630 нм, респективно. Користите 90% ацетон као бланко мерење апсорпције да исправите апсорбанцију узорка.
